Состояние естественной резистентности и иммунологической реактивности у новорожденных телят при колибактериозе

комплекса витаминов В, а также кальция, фосфора, магния и хлоридов.

В наших исследованиях (учхоз «Кетросу» района Анений Ной, ОПХ «Колоница») 26,6 % (4/15) телят, лишенных молозива, выживали, в то время как ни один теленок, кормившийся молозивом не погиб. На фермах применялось стандартное лечение, включая заменитель молока с электролитным раствором 3 дня и более и последующие 2 дня реадаптации — заменитель молока, когда диарея была корректирована (нейтрализована). Антибиотики орально не применяли для того, чтобы не уничтожить нормальную бактериальную популяцию и не вызвать фунгальный (грибной) гастроэнтерит. Значительная перегрузка организма телят антибиотиками может содействовать повышению восприимчивости к фунгальной инфекции, не поддающейся лечению[М. А. Сидоров, 1981; У. Риихикоски, 1986].

2.2.11. Клиническая оценка эффективности вакцинации коров для профилактики колибактериоза телят. Колибактериоз телят относится к числу широко распространенных инфекционных болезней молодняка и регистрируется во всех развитых странах. Наиболее ощутимый ущерб он наносит в животноводческих комплексах за счет высокой смертности, отставания в росте и снижения продуктивности переболевших животных. Одним из основных предрасполагающих факторов колибактериоза является агамма- или гипогаммаглобулинемия, обусловленные неполноценностью молозива полученного и скармливаемого несвоевременно новорожденным в условиях снижающих резистентность макроорганизма [Ю. А. Малахов, О. А. Тугаринов, М. К. Пирожков, Т. И. Исхакова, 1993].

Заболевание телят колибактериозом на 2-5 дни жизни вынуждает вакцинировать против эшерихиоза стельных коров для создания невосприимчивости у нарождающегося молодняка. Против колибактериоза вакцинируют животных во всех развитых странах. Первые вакцины колибактериоза телят начали применять в 40-х годах. Они представляли инактивированную микробную суспензию штаммов кишечной палочки, выделенных от больных или павших животных и использовались в хозяйствах различных регионов с незначительной эффективностью. Для профилактики колибактериоза в настоящее время применяют поливалентную гидрооксиалюминевую формол-тиомерсаловую вакцину против колибактериоза (эшерихиоза) поросят, телят и ягнят. Изготовляют два варианта:

Вакцина против колибактериоза поросят: О8:К43, О9:К30, О78:К80, О138:К81, О139:К82, О141:К85:К88, О147:К87:К88, О149:К91:К88.

Вакцина против колибактериоза телят и ягнят: О8:К43, О9:К30, О15:К14, :К30, О20, О26:К60, О41, О55, О78:К80, О86:К61, О115, О117:К62, О119:К69, О101:К99.

На фоне применения данной вакцины мы предусмотрели:

1. Установить серотиповую принадлежность эшерихий, выделенных от больных и павших телят.

2. Определить уровень антител, приобретенный телятами в результате вакцинации стельных коров в сыворотке молозива и сыворотке крови телят против выделенных серотипов кишечной палочки.

3. Разработать экспресс-метод для индикации «К» антител в колостральной сыворотке коров и сыворотке крови новорожденных телят.

Для выделения культур Е. coli отбирали патологический материал от павших телят, а от больных фецес, из хозяйств неблагополучных по колибактериозу, Культуры выделяли и идентифицировали в соответствии с «Методическими рекомендациями по бактериологической диагностике колибактериоза» (1981; 1991).

Принадлежность исследуемых культур Е. coli к О серогруппам устанавливали в РА с типоспецифическими О колисыворотками согласно наставлению по их применению.

Способность Е. coli образовывать фимбриальные адгезины определяли в капельной РА с моноспецифическими антиадгезивными сыворотками К99, F41, Аtt25, 987Р, К88 ав, К88 ас, К88 аd.[О. А. Полякова, Н. И. Евглевская, Н. А. Соколова, 1986].

Вакцинацию стельных коров проводили «Поливалентной гидроокисиалюминиевой формол-тиомерсаловой вакциной против колибактериоза (эшерихиоза) телят и ягнят согласно наставлению по ее применению.

Пробы фецес разводили стерильным физиологическим раствором 1:100, затем пастеровской пипеткой засевали две капли взвеси кала, культивировали на 5 %-ном кровяном агаре, Мак Конки агаре, средах Эндо и Левина при 37°С 18 ч. Е. coli пересевали со сред Эндо и Левина на МПА и МПБ. Полученные агаровые и бульонные культуры выдерживали в темном месте при комнатной температуре для дальнейшего исследования и серотипизации.

Для бактериологического исследования отбирали следующий материал от падших телят: сычуг, верхний отрезок тощей кишки, нижний отрезок тощей кишки, части подвздошной, слепой кишки, мезентеральные лимфатические узлы, печень, селезенку и почки. Пробы отбирали также из других мест, таких как суставы, головной мозг, пуповина и легкие, если клинически и патологоанатомически выявляли аномалии в них. Пробы отбирали, избегая контаминации и культивировали на 5 %-ном кровяном агаре и Мак Конки агаре. Пробы подвздошной кишки и селезенки культивировали на среде Левина. Засеянные пробирки и чашки Петри инкубировали при обычной атмосфере (аэробные условия) при 37°С 18 ч. Три колонии из преобладающих типичных колоний Е. coli были пересеяны дополнительно на среды с углеводами (глюкоза, лактоза, сахароза, манит и др.). Пробирки инкубировали при 37° С 18 ч.

Критериями для установления диагноза на колибактериоз были: клиническое и патологоанатомические исследования, отличающиеся от других случаев диареи и гибели телят и которые ассоциировались со следующими бактериологическими данными:

1. большое количество Е. coli в верхнем отрезке кишечника и региональных лимфатических узлах, а также в других интестинальных органах;

2. отсутствие других патогенных бактерий, поражающих телят.

2.2.11.1. Определение «О» антигена. Выделенные культуры классифицировали серологически в порядке сравнения с серотипами, применяемыми при вакцинации. Культуру в начале тестировали пластинчатой реакцией агглютинации на предметном стекле, 18-часовую культуру из плотной питательной среды (МПА) смывали физиологическим раствором и полученную суспензию использовали как антиген. Эту суспензию нагревали при 100° С один час для инактивирования В и L типов «К» антигена и тестировали, смешивая одну каплю антигена с одной каплей соответствующей «О» сыворотки на зеркальном стекле, размещая его над водяной баней при 60° С. Результаты учитывали через 10 мин после смешивания. Позитивную реакцию подтверждали пробирочной агглютинацией, применяя формалинизированную шестичасовую культуру в МПБ.

2.2.11.2. Определение «К» антигена. Культуру вначале тестировали пластинчатой реакцией агглютинации на предметном стекле. Одну каплю живой суспензии культуры смешивали с одной каплей различных антисывороток. Результаты учитывали в течение 30 секунд после смешивания. Позитивную агглютинацию подтверждали пробирочной агглютинацией до титра тест сыворотки, применяя как антиген живую пятичасовую культуру в МПБ. Пробирки инкубировали при 37° С два часа, в последующем агглютинационные пробирки центрифугировали при 2000 об/мин в течение трех минут.

Одинаковый диск агглютинации учитывали как позитивную реакцию.

Эффективность вакцинации коров, предназначенную для профилактики колибактериоза телят определяли в двух хозяйствах.

Проведенная серологическая типизация выделенных культур Е. coli от павших телят, родившихся от вакцинированных коров, свидетельствует, что, как правило, серологическая принадлежность в сравнении с вакцинными серотипами имеет существенное различие (табл. 2.25).

Таблица 2.25

Данные серологической типизации по «О» антигену Е. coli

Вакцинный серотип	Период исследования	Количество павших телят от коров		Изолированные серотипы в группе
		вакцинированных	невакцинированных	вакцинированной	контрольной
О8:К43 О9:К30 О15:К14:К30 О20	Ноябрь-декабрь 1991 г.	3	2	2/3*	3
О26:К60 О41 О55 О78:К80 О86:К61 О115	Ноябрь-декабрь 1992г.	2	3	1/3	2/2
О117:К62 О119:К69 О101:К99	Октябрь-декабрь 1993 г.	3	2	1/2	1/2

* числитель — типируемые; знаменатель — нетипируемые.

Из 12 родившихся телят в октябре-декабре 1993 года семь были от вакцинированных коров, и пять от невакцинированных. У четырех телят из пяти от невакцинированных коров наблюдали диарею и из них два погибли. Из семи телят от вакцинированных коров пять заболели на 2-3-й день жизни, три из них погибли.

Нетипируемые штаммы Е. coli . были обнаружены во всех уровнях кишечника за исключением внутренних органов. Кроме того, нетипируемые штаммы Е. coli выделяли из фекальных проб телят вначале диареи.

Из других органов (печень, селезенка) выделяли штаммы Е. coli обладающие «О» групповым антигеном, принадлежащими к серотипам О101; О8.

Таблица 2.26

Результаты серологической типизации по «К» антигену Е. coli

Возраст телят (дней)	Органы, из которых выделены Е. coli (всего / адгезивнопозитивных)
	печень	селезенка	почки	сычуг	верхний отрезок тощей кишки	нижний отрезок тощей кишки	подвздошная кишка	слепая кишка	лимфоузлы
2	1/1	1/0	-	-	1/1	-	-	-	1/1
3	1/0	1/0	1/1	-	1/1	-	-	-	-
4	1/0	1/0	1/1	-	1/1	-	-	-	-
5	1/1	1/0	-	-	-	-	1/1	-	1/0

У выделенных от телят Е. coli обнаруживали фимбрии К99, К88ас. (табл. 2.26). При анализе О серогрупповой принадлежности исследуемых культур и способности экспрессировать фимбрии установили взаимозависимость. Так, фимбрии обнаруживали у выделенных от телят штаммов Е. coli относящихся к серотипам О8 и О101.

Уровень антител молозива, полученного от вакцинированных коров и уровень антител сыворотки крови телят от этих коров представлены в табл. 2.27; 2.28.

Таблица 2.27

Титр антител в молозиве коров и сыворотке крови телят (серотип О8) Е. coli

Возраст телят (дней)	Сыворотка молозива*		Сыворотка крови телят		Исход**
	«О» антиген	«К» антиген	«О» антиген	«К» антиген
2	20***	0	10	0	пал
3	80	10	20	0	выздоровел
4	40	0	0	0	пал
5	20	0	0	0	пал
5	160	10	40	10	выздоровел

* сыворотка молозива первого дня после отела.

** теленок пал или выздоровел.

*** обратная величина дроби.

Таблица 2.28

Титр антител в молозиве коров и сыворотке крови телят (серотип О101) Е. coli

Возраст телят (дней)	Сыворотка молозива		Сыворотка крови телят		Исход
	«О» антиген	«К» антиген	«О» антиген	«К» антиген
3	20	0	0	0	пал
2	10	0	0	0	пал
3	40	0	10	0	выздоровел
4	20	0	0	0	пал
4	40	0	20	10	выздоровел

Данные таблицы подтверждают, что вакцинация стельных коров не ингибирует серотипы Е. coli входящие в состав вакцины. Прекращение вспышек колибактериоза связано с другими факторам.

В наших исследованиях мы установили, что колибактериоз телят вызывался двумя серотипами Е. coli О8 и О101. Более ранние наблюдения [A. Dam, 1971; H. Fey, 1971a] в других странах также указывают, что более чем один серотип Е. coli может быть изолирован при заболевании телят колибактериозом.

Известно, что «К» антитела играют важную роль в защите лабораторных животных против экспериментальной Е. coli инфекции [R. K. Braun, B. C. Tennant, 1983]. Большинство тестированных телят в наших исследованиях не обладали «К» антителами к Е. coli штаммов изолированных при заболевании телят колибактериозом.

ВЫВОДЫ

• Содержание колостральных иммуноглобулинов в сыворотке крови телят отражает уровень резистентности животных.

• Концентрация иммунных глобулинов в молозиве в течение первых трех дней лактации снижается последовательно в 2,16 раза на второй день и в 4,93 раза на третий – по сравнению с первым днем.

• Уменьшение абсорбции колостральных иммуноглобулинов в 1,23 и в 1,45 раза по сравнению с контрольной группой (здоровые) животных способствует возникновению соответственно энтеритной и септической формы колибактериоза.

• Угасание абсорбции колостральный антител происходит в следующей последовательности IgG, IgM и IgA.

• Количественное содержание иммуноглобулинов в сыворотке крови и в сыворотке коров имеет существенное различие.

• Активность антител против К-антигенов в молозиве коров и в сыворотке крови телят 1-2-дневного возраста была меньшей, чем активность против О-антигенов Е. coli.

• Различная концентрация антител (титр) в сыворотке новорожденных телят против О и К-антигенов Е. coli указывает, что кормление молозивом может стимулировать или подавлять синтез антител к определенным антигенам в одинаковой степени независимо от места их локализации в бактериальных клетках.

• Протективный механизм является иммунологическим фактором и коррелирует с уровнем иммуноглобулинов против К-антигенов Е. coli и возникновением колибактериоза телят.

• Иммунизация стельных коров поливалентной гидроокисьалюминиеной формол-тиомерсаловой вакциной против колибактериоза телят не ингибирует серотипы Е. coli 08 и 0101, входящие в состав вакцины и выделенные от павших телят.

РАЗДЕЛ 3 ИЗУЧЕНИЕ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕАКТИВНОСТИ НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛяТ

3.1. Биохимический анализ крови новорожденных телят

В опытах использовали 30 телят. Их возраст в период исследования был от 2 до 10 дней. Кровь брали из яремной вены для определения следующих показателей:

рН;

СО₂ (Hg mm);

О₂ (Нg mm);

НСО₃ (m Eg/I);

N⁺ (m Еg/I);

K⁺ (m Eg/I-);

Cl  (m Eg/I);

Гематокрит (%);

Мочевина (mg/dl);

Неорганический фосфор (mg/dl);

Общий белой (g/dl).

Анализ этих показателей проводили дважды в день. В порядке изучения отклонений учитывали два условия: выживание и смерть телят. Это состояние определяли функцией учтенных параметров как максимум различий, выступающий между двумя группами.

Характеристика 2-х показателей приведена в табл. 3.1; 3.2; 3.3. Данные таблиц показывают, что некомпенсированный метаболический ацидоз всегда присутствует. Дегидратация отмечается при высоком гематокрите.

Корреляционные табл. 3.1 и 3.2 между основными показателями указывают, что определенные параметры имеют очень сходное поведение (например, 1 и 4 бикарбонатная концентрация изменяется непосредственно в зависимости от рН крови, феномен — хорошо известный). На другие параметры передается их обратная связь, как например, частичное соприкосновение с противоположной связью СО₂ и О₂.

Корреляционная матрица (табл. 3.3-3.5) показывает на сопротивление между парциальным давлением О₂ в венозной крови и показателями кислотно-щелочного равновесия, в частности парциального давления СО₂ в порядке нейтрализации метаболического ацидоза в нормальном противодействии уменьшающим парциальное давление СО₂. Следовательно, снижение парциального давления СО₂ указывает на уменьшение количества О₂ в тканях.

Группа результатов подтверждает, что некомпенсированный метаболический ацидоз вызывает диарею у телят. Существует связь между кислотно-щелочным равновесием и катаболизмом. Вероятно, что катаболизм, который имеет место при диарее, практически выражает плохо функционирующие физиологические механизмы. Кислотность убывает в основном, с фецес и это состояние прямое следствие диареи.

Моделью определения основных показателей является математическая обработка сравнимых данных, полученных в этом исследовании.

При статистической обработки результатов исследовании с применением ЭВМ «НАИРИ» крови новорожденных телят, установлено, что использование трех показателей легко измеряемых величин (мочевина, гематокрит, хлориды) позволяет прогнозировать с вероятной точностью до 78% возникновения заболевания и, следовательно, лечить с применением регидратационной терапии, возмещением кислотности и потери ионов натрия.

Некомпенсированный метаболический ацидоз – основной признак при диареи телят. Установлена связь между кислотно-щелочным равновесием и катаболизмом. Возможно, что катаболизм отражает плохо функционирующие физиологические механизмы, воздействующие на причинный агент (бактерии, вирусы).

Данные исследования показывают, что выжившие телята имеют преимущество в количественном отношении изучаемых величин перед павшими животными. Концентрация калия (мера катаболизма) имеет тенденцию к увеличению, в то время как концентрация натрия в крови уменьшается (табл. 3.6-3.7).

Таблица 3.3

Корреляционная матрица биохимических показателей нормальное значение

	pН X1	pCO2 X2	pO2 X3	CO3H  X4	Na+ X5	K+ X6	Cl  X7	PCV X8	Urea X9	P X10
X2 pCO2	0,081
X3 pO2	0,202	0,808
X4 CO3H	0,251	0,739	0,858
X5 Na+	0,408	0,749	0,823	0,895
X6 K+	0,244	0,515	0,542	0,457	0,534
X7 Cl	0,050	0,010	0,226	0,0007	0,109	0,000
X8 PCV	0,247	0,192	0,395	0,169	0,133	0,148	0,642
X9 Urea	0,168	0,055	0,112	0,230	0,121	0,282	0,633	0,844
X10 P	0,191	0,532	0,705	0,581	0,684	0,142	0,364	0,737	0,697
X11 Proteins	0,124	0,181	0,228	0,047	0,047	0,411	0,463	0,652	0,597	0,579

Таблица 3.4

Корреляционная матрица между изучаемыми отклонениями (выжившие телята)

	pН Y1	pCO2 Y2	pO2 Y3	CO3H  Y4	Na+ Y5	K+ Y6	Cl  Y7	PCV Y8	Urea Y9	P Y10
Y2 pCO2	-0,115
Y3 pO2	-0,224	0,811
Y4 CO3H	-0,267	0,726	0,888
Y5 Na+	-0,113	0,453	0,511	0,660
Y6 K+	-0,266	0,343	0,486	0,372	0,141
Y7 Cl	-0,086	0,123	0,165	0,0927	-0,090	0,830
Y8 PCV	-0,000	0,253	0,364	0,192	0,084	0,571	0,652
Y9 Urea	-0,174	0,334	0,503	0,458	0,016	0,619	0,713	0,773
Y10 P	-0,012	0,457	0,448	0,486	0,350	0,358	0,493	0,701	0,703
Y11 Proteins	-0,488	0,249	0,194	0,141	0,232	0,353	0,453	0,580	0,408	0,684

Таблица 3.5

Корреляционная матрица между изучаемыми отклонениями (павшие телята)

	pН Y1	pCO2 Y2	pO2 Y3	CO3H  Y4	Na+ Y5	K+ Y6	Cl  Y7	PCV Y8	Urea Y9	P Y10
Y2 pCO2	-0,341
Y3 pO2	-0,231	0,514
Y4 CO3H	-0,035	0,678	0,532
Y5 Na+	-0,160	0,720	0,613	0,753
Y6 K+	-0,170	0,485	0,435	0,093	0,352
Y7 Cl	-0,231	0,073	0,460	-0,265	-0,035	0,455
Y8 PCV	-0,131	0,195	0,224	0,209	0,283	0,149	0,415
Y9 Urea	-0,550	0,048	0,064	-0,130	0,147	0,120	0,294	0,231
Y10 P	-0,345	0,209	0,094	0,239	0,474	0,043	0,115	0,416	0,473
Y11 Proteins	-0,182	0,108	0,353	0,307	0,241	-0,198	0,219	0,764	0,159	0,103

Таблица 3.6

Дисперсионный анализ изучаемых отклонений (выжившие телята)

	рН Y1	PCO2 Y2	pO2 Y3	CO3H  Y4	Na+ Y5	K+ Y6	Cl  Y7	PCV Y8	Ureea Y9	P Y10	Proteins Y11
X1 pН	170,186
X2 pCO2		448,045
X3 pO2			336,005
X4 CO3H				8767,769
X5 Na+					526,250
X6 K+						98,543
X7 Cl							3,647
X8 PCV								31,369
X9 Urea									51,209
X10 P										51,599
X11 Proteins											55,281

Таблица 3.7

Дисперсионный анализ изучаемых отклонений (павшие телята)

	рН Y1	PCO2 Y2	pO2 Y3	CO3H  Y4	Na+ Y5	K+ Y6	Cl  Y7	PCV Y8	Ureea Y9	P Y10	Proteins Y11
X1 pH	32,49
X2 pCO2		37,85
X3 pO2			10,019
X4 CO3H				42,259
X5 Na+					3,408
X6 K+						56,822
X7 Cl							19,709
X8 PCV								27,002
X9 Ureea									36,472
X10 P										35,284
X11 Proteins											27,359

3.2. Коррекция кислотно-основного баланса при диареи неонатальных телят

Как правило, лечение диареи неонатальных телят направлено на, непосредственно, идентифицированные микроорганизмы с последующей элиминацией их при применении антибиотиков и химиотерапевтических препаратов. Тем не менее, многие животные не поддаются лечению, а в некоторых случаях увеличивается патогенность микроорганизмов.

При диареи телят увеличивается масса фецесс до 40 %, главным образом, за счет увеличения экскреции воды, что сопровождается значительной потерей кальция, магния, натрия и калия. Экстенсивная потеря внутриклеточного калия сопровождается выходом натрия, в течение дегидратации при диарее или в течение лечения, если калий не включается в замещающий раствор. Особенно, подвергаются потери хлорида натрия в диарейных испражнениях, так как их компоненты секретируются в гастроинтестинальном тракте[В. В. Митюшин, 1984].

Система бикарбонатно-угольная кислота является одной из наиболее важных буферных систем в организме и изменение в этой системе рефлекторно изменяет кислотно-основной баланс в целом организме. Сохранение кислотности или щелочности (основности) вызывает рефлекторное изменение бикарбонатов в сыворотке в смеси угольная кислота (Н₂СО₃) и бикарбонаты (ВНСО₃) , основу которых составляют, главным образом, натрий или калий.

Согласно формуле Гендерсона и Гассельбаха, рассчитанной на основании константы диссоциации Н₂СО₃ (К= 6, I) и соответствия растворимых в плазме бикарбонатов (27 ммоль/л) и угольной кислоты (1,35 ммоль/л), рН крови равен:

Нормальное соотношение угольной кислоты и бикарбонатам равняется 1:20. Если рН сыворотки известно, кислото (угольная)   бикарбонатное отношение определяется также по Гендерсона-Гассельбаха уравнению. Таким образом, при рН 7,4 отношение составляет 1:20, при рН 7,2   1:12, при рН 7,1 падает до 1:10. Следовательно, если рН ниже чем 7,3 то будет не компенсированный ацидоз.

При нормальном состоянии, натрий в клетках находится в незначительной концентрации, при аномальном состоянии может поступать в клетки в увеличенном количестве, замещая калий. Калий выделяется из клетки и поступает в кровь и если почечная функция нормальная избыток выделяется в мочу. Высокий уровень калия в сыворотке приводит к очень значительному дефициту калия в организме [E. W. Fisher and de la G. H. Fuente, 1972; А. Г. Шитый, Н. С. Дудникова, Л. М. Тихомирова, 1993].

Дегидратацию при диареи учитывают как неотложную для замещения потерянной жидкости парентеральным введением растворов. Применяют исключительно 0,9 % раствор хлорида натрия для этой цели не без опасности содержания избытка ионов хлорида и недостатка других ионов, удаленных при таком состоянии.

В настоящем исследовании преследуются две цели:

• первая   изучить и зарегистрировать изменения в кислотно-основном уровне электролитов в сыворотке телят при диареи;

• вторая   изучить влияние при парентеральном введении электролитных растворов при этих изменениях.

Значение гематокрита получали, применяя гематокритные пробирки. Центрифугировали при 2500 об/мин в течение 30 мин. Сахар крови определяли в 0,05 мл цельной крови. Уровень изучаемых показателей определяли у 10 телят 4-6 дневного возраста. Балансирующий электролитный раствор применяли для парентеральной терапии в течение этого исследования [Е. Рашкова, Т. Сехер, К. Рашка, В. Матейовска, Л. Палак, 1976; J. Blanu, J. H. Parvu, O. Ivanciu, 1983].

Случай 1. Телята (4) 4 дневного возраста. Санитарное состояние на ферме неудовлетворительное. В первый день животные были вялые и сонные, не способные ходить и питаться, вставали с трудом. Обрабатывали химиотерапевтическими препаратами и вводили один литр раствора электролита интраперитонеально. На второй день животные выздоравливали.

Случай 2. Телята (4) 5 дневного возраста. В первый день животные были вялыми и летаргическими с профузной диареей, на второй день телята были неспособные подниматься. Антибиотикотерапию проводили на первый, второй и третий день. Один литр электролитного раствора вводили в первый день и два литра на второй день. На третий день диарея была менее явной, на 4 день фецес были почти нормальными.

Случай 3. Телята (2) 6 дневного возраста болели диареей в неопределенное предшествующее время. Антибиотикотерапия не улучшала общее состояние. Телята были в коматозном состоянии с холодным липким ртом, поверхностным дыханием и стекловидными запавшими глазами. Два литра электролитного раствора вводили в первый день. Утром на второй день животные были бодрыми, способными передвигаться и пить энергично молоко. Температура была 39,2° С, фецес были жидкими, но не диарейными.

Анализ образцов крови, сыворотки и уровень гематокрита указывает, что в случае 1 увеличивается калий и натрий в сыворотке крови, несмотря на краткое течение заболевания. В случае втором, электролитное изменение находилось в соответствии с клиническим состоянием. Сывороточные бикарбонаты, хлориды и кальций были ниже нормы, а сывороточный калий выше нормы, когда симптомы были тяжелыми и приходили к нормальному значению с улучшением клинического состояния. В случае 3 сывороточный бикарбонат, кальций и натрий были ниже нормы, а сывороточный калий и неорганический фосфор (12,5мг/100 мл) были увеличены , когда клиническое состояние было тяжелым. В течение 48 ч лечения с восстанавливающим раствором электролитные образцы и клиническое состояние были нормальными.

Наиболее постоянным показателем в трех случаях было уменьшение в сывороточном бикарбонатном уровне, сопровождающееся низким рН сыворотки.

В двух случаях (2, 3) рН была ниже 7,3 в первый день заболевания и превалировало состояние не компенсаторного ацидоза. Компенсация в большинстве случаев поддерживалась до бикарбонатного уменьшения в пределах 20. Вероятно, ацидоза будет избыточным при сохранении кислотности и потери щелочности. Характерной особенностью в изучаемых случаях было отклонение от нормы уровня сывороточного калия, который был увеличен во всех случаях в начальной стадии заболевания. Дефицит калия в клетках вызывает состояние нечувствительности (оцепенение, коматозное состояние). Является общепризнанным фактом, что с уменьшением бикарбонатов, происходит повышение хлоридов, которые компенсируют бикарбонаты. Уровень глюкозы во втором и третьем случаях был ниже, чем 10мг/100мл.

Уровень гематокрита указывал на степень дегидратации. Следовательно, раннее применением антибиотиков и химиотерапевтических препаратов, контролирующих диарею, предотвращает электролитное изменение. При экстенсивных отклонениях сывороточных рН, бикарбонатов, хлоридов, натрия, калия и кальция лечение антибиотиками и химиотерапевтическими препаратами является бесперспективным.

3.3. Изменение фагоцитарныхных показателей у новорожденных телят в зависимости от клинического статуса

Общая невосприимчивость животных к неблагоприятным факторам внешней и внутренней среды обусловлена иммунобиологической реактивностью организма. Известно, что неспецифические защитные факторы организма детерминируются генетическим характером и могут быть выражены с различной силой в зависимости от физиологического состояния животных, сезона года, условий кормления и содержания [С. J. Howard, A. A. Glynn, 1971; В. В. Никольский, В. П. Литвин, 1974; В. Я. Мозгис, 1982; В. Т. Сидоров, 1984; В. П. Павличенко, О. В. Милованов, Н. Н. Берникова, 1985].

Новорожденные животные обладают незначительной устойчивостью к возбудителям инфекционных заболеваний. До выпойки молозива основную защитную функцию выполняют клеточные защитные факторы. Важнейшим фактором к клеточной защитной системе организма является опсонофагоцитарная реакция лейкоцитов.

Целью исследования было изучение фагоцитарных показателей у новорожденных телят в онтогенезе, и их взаимосвязь с сохранностью животных в условиях хозяйств республики.

Изучали показатели клеточной защиты организма новорожденных телят: фагоцитарную активность и интенсивность. При постановке опсонофагоцитарной реакции а качестве тест культуры использовали серотип О78 Е. coli . Бактериальную взвесь готовили из 24 ч агаровой тест культуры путем смыва физиологическим раствором и по оптическому стандарту мутности устанавливали концентрацию 2 млрд. микробных тел в 1 мл.

В мазках подсчитывали 50 нейтрофилов и количество захваченных ими микробов, после чего вычисляли фагоцитарную активность и фагоцитарную интенсивность [В. Я. Мозгис, 1982].

В результате проведенных опытов на телятах от рождения до 30-днеаного возраста было установлено, что новорожденный организм обладает достаточно выраженной клеточной защитной реакцией (табл. 3.8-3.15) Фагоцитарная активность лейкоцитов у 2-дневных телят составляла (в %) 44,78±0,58, фагоцитарная интенсивность 1,94±0,02. Показатели активности и интенсивности фагоцитоза повышались до 5-дневного возраста, затем в возрасте 10 дней наблюдалось их снижение. Количество лейкоцитов, участвующих в фагоцитозе, в этот период снизилось до 41,67 ± 0,65, что на 10,66 % (Р<0,05) ниже, чем у 5-дневных телят.

В первой опытной группе (больные телята) фагоцитарная активность на 2-й,. 5-й, 10-й день имеет существенные различия, т. е. наблюдается достоверное снижение, как фагоцитарной активности, так и интенсивности соответственно на 6,67; 11,33 и на 6,34 % фагоцитарной активности и в этот же наблюдаемый период отмечали снижение фагоцитарной интенсивности в 1,02, 1,09 и в 1,01 раза по сравнению с контрольной группой.

Во второй подопытной группе (больные-павшие) фагоцитарные показатели: активность н интенсивность имеет существенное различие на 2-й и 5-й день возрастного периода новорожденных телят. Так, фагоцитарная активность на 2-й день в контрольной группе была 44,78±0,58, во второй опытной группе 24,57±0,43; на 5-й день соответственно 52,33±0,60 и 23,50±0,15. Следовательно, количество лейкоцитов, участвующих в фагоцитозе уменьшилось на 20,2 % на 2-й день и на 28,83 % на 5-й день. Фагоцитарная интенсивность в контрольной и во 2-й подопытной группе также имеет существенные различия. Так, на 2-й день в контрольной группе этот показатель равнялся 1,94±0,02, а во второй опытной группе 1,79±0,004, т. е. в 1,08 раза меньше, на 5-й день это значение, также достоверно было различимо 2,32±0,02 и 1,77±0,016, т. е. фагоцитарная интенсивность в этот период снизилась в 1,З1 раза (Р<0,05), по сравнению с контрольной группой. Уровень фагоцитарной активности и фагоцитарной интенсивности в крови телят в послемолозивный период статистически достоверно повышались до 5-дневного возраста в контрольной группе (здоровые) соответственно +7,55 и +0,38( Р<0,001) и первой подопытной +2,89 и + 0,23 (Р<0,001). Во второй подопытной группе достоверное повышение фагоцитарных показателей отмечали при сравнении с их уровнем в период до поения молозива. Следовательно, лейкоцитарный фагоцитоз является важнейшим показателем иммунобиологического состояния. Так, снижение фагоцитарных показателей фагоцитарной активности на 6,67 % (2-й день) и 11,33 % 5-й день и соответственно фагоцитарной интенсивности в 1,02 и 1,09 раза на 2-й и 5-й дни указывает на высокий риск заболеваемости. При снижении фагоцитарной активности на 20,21 (2-й день) и 28,83 % (5-й день) по сравнению с контрольной группой (здоровые) неизбежно приводит к гибели новорожденных животных.

3.4. Бактерицидная активность сыворотки крови новорожденных телят

Состояние естественной резистентности организма наиболее полно характеризует бактерицидная активность сыворотки крови, которая заключается в способности подавлять рост микроорганизмов и зависит от активности всех гуморальных факторов неспецифической устойчивости. Бактерицидную активность сыворотки крови используют как один из критериев оценки тяжести состояния организма при инфекционных болезнях и эффективности проводимой терапии в ветеринарной практике[П. А. Емельяненко, 1979; В. В. Биктимиров, 1993].

Цель наших исследований   определить уровень бактерицидной активности сыворотки крови у новорожденных телят в динамике с момента рождения (до выпойки молозива) до 30-дневного возраста и предложить иммуностимуляторы, обеспечивающие высокую эффективность проводимой терапии.Бактерицидную активность сыворотки крови определяли по О. В. Смирновой и А. Т. Кузьминой (1966). В качестве тест микробов использовали S форму Е. coli.

Для измерения ингибирования роста Е. coli в бульоне Хоттингера при добавлении сыворотки крови, культуру высевали в МПБ. В пробирку стерильно разливали по 4,5 мл бульона Хоттингера, добавляли по 1 мл испытуемой сыворотки и по 0,1 мл взвеси суточной культуры. Две пробирки со средой оставляли в качестве контроля. Из каждой опытной и контрольной пробы стерильно отбирали по 2 мл и определяли их исходную оптическую плотность (Ао/исх и Ак/исх) на ФЭК-56 М при длине волны 364 нм (красный светофильтр), кювета 3 мм против бульона Хоттингера (оптический контроль)[Н. Н. Максимюк, Л. Я. Телешевская, 1995].

По классическому методу оптическую плотность измеряют при зеленом светофильтре. При использовании зеленого светофильтра, регистрируется окраска среды. Для исключения влияния этого фактора необходим дополнительный оптический контроль для каждой пробы в начале опыта. Чем больше гемолиз сыворотки, тем сильнее окраска среды и выше неспецифическое поглощение. Применение для этой цели красного светофильтра исключает влияние окраски среды. Пробы культивировали 6 ч при 37°С и рассчитывали бактерицидную активность в %.

Бактерицидную активность определяли как отношение роста микроорганизмов в опытной среде по сравнению с контрольной (без сыворотки) в процентах.

В результате проведенных исследований было установлено, что сыворотка крови новорожденных телят обладает выраженной бактерицидной активностью (табл. 3.16-3.19).

Бактерицидная активность сыворотки крови телят зависит от возраста, причем наименьший ее уровень отмечали у новорожденных телят до приема молозива.

На 2-й день жизни телят имело место достоверное повышение бактерицидной активности сыворотки у здоровых телят на 12,09 %, в 1-ой подопытной группе (больные) на 6,09 % и снижение во 2-й подопытной группе на 1,58 % в сравнении с периодом по выпойки молозива. На 5-й и 10-й дни отмечали